Chelseanfallaren Álvaro Morata får nu betala priset för sin tuffa debutsäsong i Premier League.
Det blir inget VM för spanjoren.
- Beslutet är alltid svårt med tanke på de talanger som vi har. Vi har tagit med tre andra anfallare på den positionen och att ha fyra var inget som vi ville ha, säger förbundskaptenen Julen Lopetegui.
Även Moratas Chelseakollegor Cesc Fabregas och Marcos Alonso, lämnas utanför VM-truppen.
Lopetegui tar heller inte med Javier Martinez, Bayern München, och Sergi Roberto, Barcelona. I stället ger han några unga och relativt oprövade spelare chansen i Ryssland.
Tolv spelare i truppen är VM-debutanter: Isco, Marco Asensio, Nacho Fernandez, Dani Carvajal, Lucas Vazquez, Iago Aspas, Rodrigo, Alvaro Odriozola, Kepa, Saul, Nacho Monreal och Thiago Alcantara.
Andres Iniesta och Sergio Ramos ska spela VM för fjärde gången.
- Vi tycker att det här var det mest balanserade beslutet, och tror att de här spelarna ska hjälpa oss bäst i VM, säger förbundskaptenen.
Spanien inleder VM mot Portugal den 15 juni och möter även Iran och Marocko i gruppspelet.
Fakta: Truppen
Målvakter: David De Gea, Manchester United, Kepa Arrizabalaga, Athletic Bilbao, Pepe Reina, Napoli.
Försvarare: Dani Carvajal, Real Madrid, Alvaro Odriozola, Real Sociedad, Gerard Piqué, Barcelona, Sergio Ramos, Real Madrid, Nacho Fernandez, do, Cesar Azipilicueta, Chelsea, Jordi Alba, Barcelona, Nacho Monreal, Arsenal.
Mittfältare: Sergio Busquets, Barcelona, Saúl Niguez, Atlético Madrid, Andres Iniesta, Barcelona, Thiago Alcantara, Bayern München, Koke, Atlético Madrid, Isco, Real Madrid, David Silva, Manchester City.
Anfallare: Marco Asensio, Real Madrid, Lucas Vázquez, do, Diego Costa, Atlético Madrid, Rodrigo Moreno, Valencia, Iago Aspas, Celta Vigo.